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SYPRO Orange ist ein Fluoreszenzfarbstoff vom Merocyanin-Typ,cite-ref-demchenko-1-1[1] der im Zuge einer Proteincharakterisierung zur Proteinfärbung verwendet wird,cite-ref-ep0774122-2-1[2] meistens in einer SDS-PAGE.cite-ref-4[4]cite-ref-5[5]

• Eigenschaften

• Einzelnachweise

SYPRO Orange bindet wie auch sein Analogon SYPRO Red selektiv an Proteine über 6,5 Kilodalton (auch Glykoproteine) in SDS-Micellen,cite-ref-demchenko-1-2[1] nicht jedoch an DNA oder Lipopolysaccharide.cite-ref-sigma-6-0[6]cite-ref-7[7] SYPRO Orange ist gemäß Verordnung (EG) Nr. 1272/2008 (CLP) nicht als gefährlich eingestuft,cite-ref-sigma-6-1[6] da seine Toxizität und Mutagenität aufgrund der geringen Produktionsmenge unbekannt ist. Das Absorptionsmaximum liegt bei λ = 470 nm, die Emission ist bei λ = 569 nm maximal.cite-ref-8[8] Die Sensitivität bei SDS-PA-Gelen liegt mit SYPRO Orange bei etwa 4–8 ng Protein,cite-ref-sigma-6-2[6]cite-ref-molecular-probes-9-0[9] also etwas schlechter als bei der Silberfärbung. Aufgrund der Fluoreszenz besitzt die SYPRO Orange-Färbung bei einer Mengenabschätzung im Vergleich zur Silberfärbung oder Coomassie einen größeren linearen dynamischen Bereich, d. h. eine bessere Korrelation zwischen der Proteinmenge und der Signalintensität.cite-ref-sigma-6-3[6] SYPRO Orange eignet sich nicht zur Färbung von Proteinen auf Western Blots, 2D-Gelen oder IEF-Gelen.cite-ref-sigma-6-4[6] Im Gegensatz zur Silber- und Coomassie-Färbung werden zur Fixierung vor einer Färbung zwar auch Essigsäure, aber keine Alkohole wie Methanol oder Ethanol verwendet, da SYPRO Orange zur Färbung auf die Anwesenheit von SDS angewiesen ist.cite-ref-molecular-probes-9-1[9] SYPRO Orange wird als 10 mM Lösung in Dimethylsulfoxid geliefert.cite-ref-10[10]

cite-note-demchenko-11. Aleksandr Petrovich Demchenko: Advanced Fluorescence Reporters in Chemistry and Biology III: Applications in Sensing and Imaging Band 3 von Advanced Fluorescence Reporters in Chemistry and Biology. Springer 2011. ISBN 9783642180354. S. 179ff.

cite-note-ep0774122-22. Patent EP0774122B1: Protein-Färbung mittels Merocyanin Farbstoffe. Angemeldet am 20. Mai 1996, veröffentlicht am 19. August 2009, Anmelder: Molecular Probes Inc, Erfinder: Richard P. Haugland et al.‌

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